质量，从原辅料的把关做起
－－新生牛血清支持细胞增殖检查
近几年，动物疫病在国内广泛流行，我公司细胞灭活疫苗生产量成倍加大，对原辅料血清使用量也增加到每年几千万毫升。目前原辅料新生牛血清的使用量大、供应厂家多、标准不统一、质量不稳定，存在诸多的问题。为了提高产品质量，加强原辅料质量控制，根据《中华人民共和国药典》2005版三部检验规定的要求，我部对进厂新生牛血清的检验增加了支持细胞增殖检查项目。两年来完成了血清细胞生长曲线、细胞倍增时间、细胞克隆率等指标的测定，积累了大量的数据并进行了认真的分析，初步形成了血清细胞增殖检查标准。
本项检验能够测出不同血清批次之间微小的质量差异，客观、真实地评价进厂新生牛血清的质量，根据检测结果对生产工序中的血清加量、配比进行科学、合理的调整，在提高细胞质量的同时有目的地节约生产成本，并从源头上解决了因为血清因素造成的产品质量问题。
附：2005版《中华人民共和国药典》相关标准
－－细胞生长曲线测定
细胞生长曲线测定：取待检血清按10%浓度配制细胞培养液，按1×104/ml的细胞浓度接种细胞于96孔细胞培养板培养，每天记数活细胞，连续观察一周，并绘制生长曲线,细胞的最大增殖浓度应不低于1×106/ml。
－－细胞倍增时间测定
细胞倍增时间的测定 ：按细胞生长曲线计算细胞的倍增时间。取细胞峰值前一天计得的数（Y）、接种细胞数（X）及生长时间（T）计算。
倍增时间=T/A A=log2Y/X
最高细胞倍增时间不能超过20小时。
－－细胞克隆率测定
细胞克隆率的测定：按有限细胞稀释法将细胞稀释，并按1～2个细胞/孔的浓度接种于96孔培养板，37℃，5%CO2条件下培养1周后计算克隆率。
克隆率=（A/B）×100%
式中：A——细胞生长阳性孔数； B——接种细胞的总孔数。 |
